لتحسين كفاءة اختبار المبيدات الحشرية الهوائية على البعوض.

يُعدّ تطوير أساليب موثوقة وموحدة لاختبار حساسية أسراب البعوض للمبيدات الحشرية أمرًا بالغ الأهمية لفهم فعالية المكونات أو التركيبات النشطة الجديدة. وتُعتبر أساليب اختبار حساسية أسراب البعوض للمبيدات الحشرية الملامسة أو المنتجات (مثل تلك المُروّج لها في برامج الصحة العامة) راسخة وموحدة. مع ذلك، فإنّ أساليب اختبار المبيدات الحشرية المتطايرة أو الرذاذية المستخدمة في المنتجات المنزلية يصعب تطبيقها بفعالية. وبناءً على توصيات منظمة الصحة العالمية بشأن المبيدات الحشرية المنزلية، طوّرنا أسلوبًا موحدًا وعالي الإنتاجية لاختبار المنتجات الرذاذية باستخدام بعوض محصور في أقفاص، بالإضافة إلى أسلوب تطهير فعّال يُجرى في غرفة اختبار بيت-غرادي (غرفة اختبار PG). وقد تحقّقنا من فعالية هذا الأسلوب الجديد باستخدام مجموعات من بعوض الزاعجة والأنوفيلة المقاومة والحساسة للمبيدات الحشرية. ومن الميزات الجديدة لهذا الأسلوب تضمين غرفة مُوجّهة نحو أقفاص البعوض، مما يسمح بتقييم كمّي فوري لمعدلات قتل البعوض بعد التعرّض للمبيدات الحشرية. تُزيل عملية التطهير بالمسحة بفعالية بقايا زيت الرذاذ المحتوي على البيريثرويد من سطح حجرة الاختبار، حيث تقل معدلات النفوق عن 2% للبعوض الحساس الذي تم اختباره مباشرةً على سطح الحجرة. لم يُلاحظ أي تباين مكاني في معدلات القتل أو النفوق بين البعوض المحبوس في حجرة PG. توفر طريقتنا ذات القفص المزدوج إنتاجية أعلى بثماني مرات من طريقة الطيران الحر، مما يُمكّن من الاختبار المتزامن لسلالات مختلفة من البعوض والتمييز الفعال بين مجموعات البعوض الحساسة والمقاومة التي تم اختبارها بالتوازي.
حتى الآن، اقتصر استخدام المبيدات الحشرية البخاخية بشكل أساسي على المنازل للحماية الشخصية، مع استخدام محدود في برامج الصحة العامة. ومع ذلك، أظهرت دراسات حديثة انتشار استخدام المبيدات الحشرية المنزلية في المناطق التي تنتشر فيها الأمراض المنقولة بالنواقل. وسواء كان الدافع هو طرد البعوض أو الوقاية من الأمراض، ثمة حاجة ماسة إلى طرق موحدة وسهلة الاستخدام لفحص تجمعات البعوض المحلية لتحديد مدى حساسيتها للمبيدات الحشرية المنزلية. وهذا أمر بالغ الأهمية للتنبؤ بفعالية المبيدات الحشرية ضد النواقل المحلية وفهم كيفية تأثير استخدام المبيدات الحشرية المنزلية على الانتقاء التطوري لمقاومة المبيدات الحشرية.
يوفر الأسلوب التكميلي 1 تعليمات مفصلة خطوة بخطوة لإجراء برنامج اختبار المبيدات الحشرية الهوائية.
على الرغم من أن إرشادات منظمة الصحة العالمية توصي باستخدام أجهزة التبخير الآلية، إلا أنها لا تقدم مواصفات فنية محددة. يُعد استخدام أجهزة التبخير الآلية أمرًا بالغ الأهمية، لأن التبخير اليدوي في حجرة البروبيلين جليكول ليس فقط مُرهقًا، بل قد يُسبب أيضًا تفاوتًا في توزيع الرذاذ واختلافًا في مدة التبخير.
يجب تعقيم حجرة التفاعل بعد كل اختبار، لكن طريقة التنظيف الداخلي الموصى بها في إرشادات منظمة الصحة العالمية تتضمن استخدام الماء من خرطوم. في عملنا اليومي، تُعد هذه الطريقة الخطوة الأكثر استهلاكًا للوقت والجهد في تشغيل المعدات التحليلية الحيوية، لذلك قمنا بتطوير واختبار إجراء تعقيم يعتمد على المسحات.
يتم التعامل مع الأجزاء القابلة للإزالة من المروحة كما هو موضح أعلاه، ويتم تنظيف شفرات المروحة وإطارها بإسفنجة مشبعة بمحلول Decon 90 بنسبة 5٪.
استنادًا إلى العلاقة بين مدة الرش ومعدل توزيع المنتج، أظهر موزع الرذاذ الخاص بنا دقة جيدة في التحكم بنسبة جرعة الرذاذ، على الأقل ضمن النطاق المختبر من 1 إلى 4 أضعاف. وكما هو موضح في الشكل 3ب، تُعد هذه الخاصية بالغة الأهمية لتحديد علاقة الجرعة بالاستجابة لتركيبات الرذاذ الجديدة أو لتحديد جرعة الكشف عن مقاومة المبيدات الحشرية.
نُبين أن بروتوكولنا المُعدَّل لتقييم مبيدات الحشرات المنزلية المُستخدمة في البخاخات، باستخدام التطهير بالمسحات، والأقفاص المزدوجة، وأجهزة الرش التي يتم التحكم فيها عن بُعد، والتسجيل البيومتري من كاميرات الحركة، يُعد بديلاً أكثر فعالية وجدوى للبروتوكولات الحالية.^منالتوصيات. توفر طريقة التطهير بالمسحة، التي لا تستغرق سوى 20 دقيقة، وقتًا كبيرًا مقارنةً بالبروتوكول الحالي (الذي يتطلب عادةً ساعة واحدة لكل غرفة اختبار). كما أنها تقلل من الوقت الذي يقضيه المشغلون في ارتداء معدات الوقاية الشخصية الكاملة (مثل خوذات التنفس وملابس العمل المضادة للكهرباء الساكنة). علاوة على ذلك، تُنتج هذه الطريقة كمية أقل من السوائل والملابس الملوثة للمعالجة مقارنةً بالتنظيف الكامل لغرفة الاختبار، مما يقلل من احتمالية تلوث الغرفة التي تحتوي على غرفة الاختبار. تُعد طريقة التطهير بالمسحة مناسبة أيضًا لتطهير غرف الاختبار شبه الدائمة التي تتطلب^{الحد الأدنى}وضع الأثاث في تصميمات غرف متنوعة.
تُعدّ مسألة توحيد جرعات المبيدات الحشرية المستخدمة في البيئة، عبر بروتوكولات الاختبار المختلفة، من القضايا الرئيسية التي تناولتها هذه الدراسة وغيرها. وكما هو موضح في الشكل 2ب، فعلى الرغم من ثبات مدة الرش، إلا أن حجم الرش يختلف باختلاف أنواع عبوات الرذاذ، مما قد يعكس اختلافات في عمليات التصنيع (مثل الضغط الداخلي، واستخدام المواد الدافعة، وبنية الفوهة، إلخ). علاوة على ذلك، فإن النقص الحالي في أجهزة الرش عن بُعد المتوفرة تجاريًا والتي تتمتع بالمرونة المطلوبة في مدة الرش يحدّ من استخدامها في تقييم العلاقة بين الجرعة والاستجابة في مكافحة البعوض. كما أن الرش اليدوي عبر فتحات الاختبار أو فتحات الوصول (إن وُجدت) قد يؤدي إلى اختلافات في جرعات التعرض. في الواقع، تُبرز نتائجنا الحاجة إلى الحدّ من مصادر التباين هذه وأهميتها. بالنسبة لسلالات بعوضة الزاعجة المصرية المقاومة، لاحظنا وجود ارتباط بين جرعة الرذاذ والتحديد النهائي للحساسية أو المقاومة (الشكل 3ب). من الناحية المثالية، ينبغي توحيد جرعات الرذاذ بالجرامات من المادة المُرَذَّذة بدلاً من مدة التذرية لتسهيل المقارنات بين الدراسات المختلفة.
يُقدّم RCAD منهجًا بديلًا للبحوث المستقبلية يُقلّل من تأثير اختلافات العمليات. على الرغم من أننا وجدنا أن توحيد رذاذات الأيروسول غير ممكن، فقد أثبتنا إمكانية تقدير كتلة الأيروسول المُوَصَّلة عبر عبوات الأيروسول المختلفة بدقة عالية من خلال معايرة طول الرذاذ (الشكلان 2ب، 3أ). يُعدّ توحيد تركيز الأيروسول في أي حجرة اختبار أمرًا بالغ الأهمية لتحسين قابلية تكرار النتائج.
استنادًا إلى خبرتنا وخبرات مجموعات بحثية أخرى، فإن التوصيات الواردة في الدليل الإرشادي الحالي بشأن استخدام طرق الكشف عن الهباء الجوي لاختبار البعوض الطليق تُشكّل تحديات لوجستية كبيرة للدراسات المختبرية وشبه الميدانية. فعلى سبيل المثال، تتميز طرق الكشف عن البعوض الطليق بانخفاض إنتاجيتها (بما في ذلك إعادة اصطياد البعوض الطليق الناجي، وهي عملية تتطلب جهدًا كبيرًا)، كما أنها تعاني من عدد من القيود التقنية، مثل صعوبة تحديد معدلات القتل في الوقت الفعلي.
على الرغم من أن تجربتنا المُثبتة باستخدام القفص المزدوج تعالج مشكلة محدودية التدفق وتُعدّ طريقةً عمليةً لفحص حساسية البعوض للمبيدات الحشرية الهوائية، تجدر الإشارة إلى أن معدلات نفوق بعوض جزر كايمان كانت أقل بكثير في تجربة القفص مقارنةً بتجربة الطيران الحر (الشكل 5ج، الجدول 1). قد يعكس هذا الاختلاف انخفاض جرعة المبيد الحشري داخل القفص، حيث يخترق عدد أقل من قطرات الرذاذ الشبكة ويدخل القفص. يمكن للدراسات المستقبلية استخدام أقمشة ذات فتحات أكبر وتصاميم أقفاص ذات معدلات تدفق هواء أعلى (مثل التصاميم الأسطوانية) لزيادة التحقق من صحة النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام الطرق التجريبية المختلفة.