يحفز الباكلوبوترازول التخليق الحيوي للتريتربينويد عن طريق تثبيط منظم النسخ السلبي SlMYB في زهر العسل الياباني.

تحتوي الفطريات الكبيرة على مجموعة غنية ومتنوعة من المستقلبات النشطة بيولوجيًا، وتُعتبر موارد حيوية قيّمة. يُعدّ فطر Phellinus igniarius من الفطريات الكبيرة التي تُستخدم تقليديًا لأغراض طبية وغذائية، إلا أن تصنيفه واسمه اللاتيني لا يزالان محل جدل. وباستخدام تحليل محاذاة أجزاء الجينات المتعددة، أكّد الباحثون أن فطر Phellinus igniarius والأنواع المشابهة له تنتمي إلى جنس جديد، وأسسوا جنس Sanghuangporus. ويُعدّ فطر زهر العسل Sanghuangporus lonicericola أحد أنواع Sanghuangporus المعروفة عالميًا. وقد حظي فطر Phellinus igniarius باهتمام كبير نظرًا لخصائصه الطبية المتنوعة، بما في ذلك السكريات المتعددة، والبوليفينولات، والتربينات، والفلافونويدات. وتُعدّ التربينات الثلاثية المركبات الدوائية النشطة الرئيسية لهذا الجنس، إذ تُظهر خصائص مضادة للأكسدة، ومضادة للبكتيريا، ومضادة للأورام.
تتمتع مركبات الترايتيربينويد بإمكانات هائلة للتطبيقات التجارية. ونظرًا لندرة موارد فطر سانغوانغبوروس البرية في الطبيعة، فإن تعزيز كفاءة التخليق الحيوي وإنتاجيته يُعدّ أمرًا بالغ الأهمية. وقد أُحرز تقدم ملحوظ في تحسين إنتاج العديد من المستقلبات الثانوية لفطر سانغوانغبوروس باستخدام محفزات كيميائية للتحكم في استراتيجيات التخمر المغمور. فعلى سبيل المثال، ثبت أن الأحماض الدهنية غير المشبعة، والمحفزات الفطرية، والهرمونات النباتية (بما في ذلك ميثيل جاسمونات وحمض الساليسيليك) تزيد من إنتاج الترايتيربينويد في فطر سانغوانغبوروس.(مجموعات الموارد البشرية)يمكن أن ينظم PBZ عملية التخليق الحيوي للمستقلبات الثانوية في النباتات. في هذه الدراسة، تم فحص PBZ، وهو منظم نمو نباتي يُستخدم على نطاق واسع لتنظيم نمو النبات وإنتاجيته وجودته وخصائصه الفيزيولوجية. على وجه الخصوص، يمكن أن يؤثر استخدام PBZ على مسار التخليق الحيوي للتربينويدات في النباتات. أدى الجمع بين الجبريلينات وPBZ إلى زيادة محتوى كينون ميثيد ترايتيربين (QT) في نبات مونتيفيديو فلوريبوندا. كما تغير تركيب مسار التربينويدات في زيت الخزامى بعد المعالجة بـ 400 جزء في المليون من PBZ. مع ذلك، لا توجد تقارير عن استخدام PBZ في الفطر.
إضافةً إلى الدراسات التي تركز على زيادة إنتاج الترايتيربينات، أوضحت بعض الدراسات أيضًا الآليات التنظيمية لتخليق الترايتيربينات في طحلب الموريفورميس تحت تأثير المحفزات الكيميائية. وتركز الدراسات حاليًا على تغيير مستويات التعبير الجيني للجينات البنيوية المرتبطة بتخليق الترايتيربينات في مسار حمض الميفالونيك، مما يؤدي إلى زيادة إنتاج التربينويدات.^12،14 ومع ذلك، لا تزال المسارات الكامنة وراء هذه الجينات البنيوية المعروفة، وخاصة عوامل النسخ التي تنظم تعبيرها، غير واضحة في الآليات التنظيمية لتخليق الترايتيربينات في طحلب الموريفورميس.
في هذه الدراسة، تمّ التحقق من تأثير تراكيز مختلفة من منظمات نمو النبات (PGRs) على إنتاج الترايتيربين ونمو الفطريات أثناء التخمر المغمور لنبات زهر العسل (S. lonicericola). بعد ذلك، استُخدمت تقنيات الميتابولوميات والترانسكريبتوميات لتحليل تركيب الترايتيربين وأنماط التعبير الجيني المشاركة في التخليق الحيوي للترايتيربين أثناء المعالجة بـ PBZ. كما حددت بيانات تسلسل الحمض النووي الريبوزي (RNA-seq) والمعلوماتية الحيوية عامل النسخ المستهدف MYB (SlMYB). علاوة على ذلك، تمّ توليد طفرات لتأكيد التأثير التنظيمي لجين SlMYB على التخليق الحيوي للترايتيربين وتحديد الجينات المستهدفة المحتملة. واستُخدمت فحوصات إزاحة الهجرة الكهربية (EMSA) لتأكيد تفاعل بروتين SlMYB مع محفزات الجينات المستهدفة لـ SlMYB. باختصار، كان الهدف من هذه الدراسة هو تحفيز التخليق الحيوي للتريتربين باستخدام PBZ وتحديد عامل النسخ MYB (SlMYB) الذي ينظم بشكل مباشر جينات التخليق الحيوي للتريتربين بما في ذلك MVD و IDI و FDPS في S. lonicericola استجابة لتحفيز PBZ.
أدى تحفيز كل من حمض الإندول أسيتيك (IAA) والفينوبنزيدين (PBZ) إلى زيادة ملحوظة في إنتاج الترايتيربينويدات في نبات زهر العسل، إلا أن تأثير تحفيز الفينوبنزيدين كان أكثر وضوحًا. ولذلك، وُجد أن الفينوبنزيدين هو أفضل محفز عند تركيز إضافي قدره 100 ملغم/لتر، وهو ما يستحق المزيد من الدراسة.