استفسار

مراقبة حساسية Phlebotomus argentipes، ناقل داء الليشمانيات الحشوي في الهند، للسايبرمثرين باستخدام اختبار مركز السيطرة على الأمراض والوقاية منها الحيوي في الزجاجة | الآفات والناقلات

داء الليشمانيات الحشوي (VL)، المعروف باسم كالازار في شبه القارة الهندية، هو مرض طفيلي يُسببه طفيلي الليشمانيا السوطي، وقد يكون مميتًا إذا لم يُعالج بسرعة. ذبابة الرمل Phlebotomus argentipes هي الناقل الوحيد المؤكد لداء الليشمانيات الحشوي في جنوب شرق آسيا، حيث تُكافح بالرش الداخلي المتبقي (IRS)، وهو مبيد حشري صناعي. أدى استخدام مبيد الـ DDT في برامج مكافحة داء الليشمانيات الحشوي إلى ظهور مقاومة لدى ذباب الرمل، لذا استُبدل مبيد الـ DDT بمبيد ألفا-سايبرمثرين. ومع ذلك، يعمل ألفا-سايبرمثرين بشكل مشابه لمبيد الـ DDT، لذا يزداد خطر مقاومة ذباب الرمل تحت الضغط الناتج عن التعرض المتكرر لهذا المبيد. في هذه الدراسة، قمنا بتقييم حساسية البعوض البري وذريته من الجيل الأول (F1) باستخدام اختبار مركز السيطرة على الأمراض (CDC) الحيوي في الزجاجة.
جمعنا البعوض من عشر قرى في مقاطعة مظفربور بولاية بيهار الهندية. وواصلت ثماني قرى استخدام المبيدات الحشرية عالية الفعالية.سايبرمثرينللرش الداخلي، توقفت إحدى القرى عن استخدام السيبرمثرين عالي الفعالية، بينما توقفت قرية أخرى عن استخدامه نهائيًا. عُرضت البعوض المُجمّع لجرعة تشخيصية مُحددة مسبقًا لفترة زمنية مُحددة (3 ميكروغرام/مل لمدة 40 دقيقة)، وسُجّل معدل التثبيط ومعدل الوفيات بعد 24 ساعة من التعرض.
تراوحت معدلات نفوق البعوض البري بين 91.19% و99.47%، وتراوحت معدلات نفوق البعوض من الجيل الأول (F1) بين 91.70% و98.89%. بعد أربع وعشرين ساعة من التعرض، تراوحت معدلات نفوق البعوض البري بين 89.34% و98.93%، وتراوحت معدلات نفوق البعوض من الجيل الأول (F1) بين 90.16% و98.33%.
وتشير نتائج هذه الدراسة إلى أن المقاومة قد تتطور في P. argentipes، مما يشير إلى الحاجة إلى المراقبة المستمرة واليقظة للحفاظ على السيطرة بمجرد تحقيق القضاء عليها.
داء الليشمانيات الحشوي (VL)، المعروف باسم كالازار في شبه القارة الهندية، هو مرض طفيلي يسببه طفيلي الليشمانيا السوطي، وينتقل عن طريق لدغة إناث ذباب الرمل المصابة (ذباب ذوات الجناحين: Myrmecophaga). يُعد ذباب الرمل الناقل الوحيد المؤكد لداء الليشمانيات الحشوي في جنوب شرق آسيا. تقترب الهند من تحقيق هدف القضاء على داء الليشمانيات الحشوي. ومع ذلك، للحفاظ على معدلات إصابة منخفضة بعد القضاء عليه، من الضروري تقليل أعداد النواقل لمنع انتقاله المحتمل.
تُكافح البعوض في جنوب شرق آسيا من خلال الرش الداخلي المتبقي (IRS) باستخدام مبيدات حشرية اصطناعية. ويجعل سلوك البعوض الفضي أثناء الراحة منه هدفًا مناسبًا لمكافحة المبيدات الحشرية من خلال الرش الداخلي المتبقي [1]. وقد كان للرش الداخلي المتبقي بمادة ثنائي كلورو ثنائي فينيل ثلاثي كلورو الإيثان (DDT) في إطار البرنامج الوطني لمكافحة الملاريا في الهند آثار جانبية كبيرة في السيطرة على أسراب البعوض وتقليل حالات داء الليشمانيات الحشوي بشكل كبير [2]. وقد دفعت هذه السيطرة غير المخطط لها على داء الليشمانيات الحشوي البرنامج الهندي للقضاء على داء الليشمانيات الحشوي إلى اعتماد الرش الداخلي المتبقي كطريقة أساسية لمكافحة البعوض الفضي. وفي عام 2005، وقّعت حكومات الهند وبنغلاديش ونيبال مذكرة تفاهم بهدف القضاء على داء الليشمانيات الحشوي بحلول عام 2015 [3]. كانت جهود القضاء على المرض، والتي تتضمن مزيجًا من مكافحة النواقل والتشخيص السريع وعلاج الحالات البشرية، تهدف إلى الدخول في مرحلة التوحيد بحلول عام 2015، وهو الهدف الذي تم تعديله لاحقًا إلى عام 2017 ثم إلى عام 2020.[4] تتضمن خارطة الطريق العالمية الجديدة للقضاء على الأمراض الاستوائية المهملة القضاء على داء الليشمانيات الحشوي بحلول عام 2030.[5]
مع دخول الهند مرحلة ما بعد القضاء على مرض فيروس الحمى القلاعية (BCVD)، من الضروري ضمان عدم تطور مقاومة كبيرة لمبيد بيتا-سايبرمثرين. ويعود سبب هذه المقاومة إلى أن كلاً من مبيد دي دي تي ومبيد سايبرمثرين لهما نفس آلية العمل، أي أنهما يستهدفان بروتين VGSC[21]. وبالتالي، قد يزداد خطر تطور المقاومة لدى ذباب الرمل بسبب الإجهاد الناتج عن التعرض المنتظم لمبيد سايبرمثرين شديد الفعالية. لذلك، من الضروري مراقبة وتحديد مجموعات ذباب الرمل المحتملة المقاومة لهذا المبيد. في هذا السياق، كان الهدف من هذه الدراسة هو مراقبة حالة حساسية ذباب الرمل البري باستخدام جرعات تشخيصية وفترات تعرض حددها تشوبي وآخرون [20] الذين درسوا ذبابة P. argentipes من قرى مختلفة في منطقة مظفربور في بيهار بالهند، والتي تستخدم باستمرار أنظمة الرش الداخلي المعالجة بالسايبرمثرين (قرى IPS مستمرة). تمت مقارنة حالة حساسية P. argentipes البرية من القرى التي توقفت عن استخدام أنظمة الرش الداخلي المعالجة بالسايبرمثرين (قرى IPS السابقة) وتلك التي لم تستخدم أبدًا أنظمة الرش الداخلي المعالجة بالسايبرمثرين (قرى غير IPS) باستخدام اختبار بيولوجي لزجاجة CDC.
تم اختيار عشر قرى للدراسة (الشكل 1؛ الجدول 1)، منها ثماني قرى لديها تاريخ من الرش الداخلي المستمر للبيرثرويدات الاصطناعية (هايبرميثرين؛ تم تصنيفها كقرى هايبرميثرين مستمرة) وكان بها حالات داء الفيلاريات الحشوي (حالة واحدة على الأقل) في السنوات الثلاث الماضية. من بين القريتين المتبقيتين في الدراسة، تم اختيار قرية واحدة لم تطبق الرش الداخلي لبيتا سايبرمثرين (قرية غير رش داخلي) كقرية ضابطة، والقرية الأخرى التي طبقت الرش الداخلي المتقطع لبيتا سايبرمثرين (قرية رش داخلي متقطع/قرية رش داخلي سابقًا) كقرية ضابطة. استند اختيار هذه القرى إلى التنسيق مع وزارة الصحة وفريق الرش الداخلي والتحقق من صحة خطة العمل الدقيقة للرش الداخلي في منطقة مظفر بور.
خريطة جغرافية لمنطقة مظفر بور تُظهر مواقع القرى المشمولة بالدراسة (1-10). مواقع الدراسة: 1، مانيفولكاها؛ 2، رامداس مجهاولي؛ 3، مادوباني؛ 4، أناندبور هاروني؛ 5، باندي؛ 6، هيرابور؛ 7، مادهوبور هزاري؛ 8، حميدبور؛ 9، نونفارا؛ 10، سيمارا. أُعِدَّت الخريطة باستخدام برنامج QGIS (الإصدار 3.30.3) وملف Open Assessment Shapefile.
تم تحضير الزجاجات المستخدمة في تجارب التعرض وفقًا لطرق Chaubey et al. [20] وDenlinger et al. [22]. باختصار، تم تحضير زجاجات زجاجية سعة 500 مل قبل يوم واحد من التجربة وتم طلاء الجدار الداخلي للزجاجات بالمبيد الحشري المشار إليه (كانت الجرعة التشخيصية من α-cypermethrin 3 ميكروغرام/مل) عن طريق وضع محلول الأسيتون من المبيد الحشري (2.0 مل) على قاع الزجاجات وجدرانها وغطائها. ثم تم تجفيف كل زجاجة على بكرة ميكانيكية لمدة 30 دقيقة. خلال هذا الوقت، قم بفك الغطاء ببطء للسماح للأسيتون بالتبخر. بعد 30 دقيقة من التجفيف، قم بإزالة الغطاء وقم بتدوير الزجاجة حتى يتبخر كل الأسيتون. ثم تُركت الزجاجات مفتوحة لتجف طوال الليل. لكل اختبار مكرر، تم طلاء زجاجة واحدة، تُستخدم كعنصر تحكم، بـ 2.0 مل من الأسيتون. تم إعادة استخدام جميع الزجاجات طوال التجارب بعد التنظيف المناسب وفقًا للإجراء الذي وصفه دينلينجر وآخرون ومنظمة الصحة العالمية [22 ، 23].
في اليوم التالي لإعداد المبيد الحشري، أُزيل 30-40 بعوضة برية (إناث جائعة) من الأقفاص في قوارير ونفخوا برفق في كل قارورة. استُخدم نفس العدد تقريبًا من الذباب لكل زجاجة مغلفة بالمبيد الحشري، بما في ذلك الشاهد. كرر هذا من خمس إلى ست مرات على الأقل في كل قرية. بعد 40 دقيقة من التعرض للمبيد الحشري، سُجل عدد الذباب الذي أُسقط. أُمسكت جميع الذبابات بشفاطة ميكانيكية، ووُضعت في حاويات من الورق المقوى نصف لتر مغطاة بشبكة دقيقة، ووُضعت في حاضنة منفصلة في نفس ظروف الرطوبة ودرجة الحرارة مع نفس مصدر الغذاء (كرات قطنية منقوعة في محلول سكر 30٪) مثل المستعمرات غير المعالجة. سُجلت الوفيات بعد 24 ساعة من التعرض للمبيد الحشري. تم تشريح جميع البعوض وفحصها للتأكد من هوية النوع. تم تنفيذ نفس الإجراء مع ذباب ذرية F1. سُجلت معدلات الإسقاط والوفيات بعد 24 ساعة من التعرض. إذا كانت نسبة الوفيات في زجاجات التحكم أقل من 5%، لم يُجرَ أي تصحيح للوفيات في التكرارات. أما إذا كانت نسبة الوفيات في زجاجة التحكم ≥ 5% و≤ 20%، فقد صُحِّحت في زجاجات الاختبار لتلك التكرارات باستخدام صيغة أبوت. أما إذا تجاوزت نسبة الوفيات في مجموعة التحكم 20%، فقد استُبعدت مجموعة الاختبار بأكملها [24، 25، 26].
متوسط ​​معدل الوفيات لبعوض P. argentipes البري. تمثل أشرطة الخطأ الأخطاء المعيارية للمتوسط. يشير تقاطع الخطين الأفقيين الأحمرين مع الرسم البياني (معدل الوفيات 90% و98% على التوالي) إلى فترة الوفيات التي قد تتطور خلالها المقاومة.[25]
متوسط ​​معدل الوفيات لذرية الجيل الأول من فطريات P. argentipes البرية. تمثل أشرطة الخطأ الأخطاء المعيارية للمتوسط. تمثل المنحنيات التي يتقاطع معها الخطان الأفقيان الأحمران (معدل الوفيات 90% و98% على التوالي) نطاق الوفيات الذي قد تتطور عنده المقاومة[25].
وُجد أن البعوض في قرية مانيفولكا (مجموعة التحكم/غير الخاضعة لنظام الرش الداخلي) شديد الحساسية للمبيدات الحشرية. وبلغ متوسط ​​معدل الوفيات (±الانحراف المعياري) للبعوض البري بعد 24 ساعة من الإسقاط والتعرض 99.47 ± 0.52% و98.93 ± 0.65% على التوالي، بينما بلغ متوسط ​​معدل الوفيات لأبناء الجيل الأول 98.89 ± 1.11% و98.33 ± 1.11% على التوالي (الجدولان 2 و3).
تشير نتائج هذه الدراسة إلى أن ذباب الرمل فضي الأرجل قد يُطور مقاومةً لمبيد البيرثرويد الصناعي (SP) ألفا-سايبرمثرين في القرى التي استُخدم فيها هذا المبيد بشكل روتيني. في المقابل، وُجد أن ذباب الرمل فضي الأرجل المُجمع من قرى غير مشمولة ببرنامج مكافحة الآفات الداخلية (IRS) شديد الحساسية. يُعدّ رصد حساسية مجموعات ذباب الرمل البري أمرًا بالغ الأهمية لرصد فعالية المبيدات الحشرية المستخدمة، إذ قد تُساعد هذه المعلومات في إدارة مقاومة المبيدات. وقد أُبلغ بانتظام عن مستويات عالية من مقاومة مبيد دي.دي.تي لدى ذباب الرمل من المناطق الموبوءة في بيهار، وذلك بسبب الضغط الانتقائي التاريخي الذي مارسته إدارة الآفات الداخلية (IRS) باستخدام هذا المبيد [1].
وجدنا أن فطريات P. argentipes حساسة للغاية للبيرثرويدات، وأظهرت التجارب الميدانية في الهند وبنغلاديش ونيبال أن مبيدات الآفات الداخلية (IRS) تتمتع بفعالية حشرية عالية عند استخدامها مع سايبرمثرين أو دلتامثرين [19، 26، 27، 28، 29]. ومؤخرًا، أفاد روي وآخرون [18] بأن فطريات P. argentipes طورت مقاومة للبيرثرويدات في نيبال. وأظهرت دراسة الحساسية الميدانية التي أجريناها أن ذباب الرمل فضي الأرجل الذي جُمِع من قرى غير معرضة للمبيدات الداخلية كان شديد الحساسية، ولكن الذباب الذي جُمِع من قرى تعرضت للمبيدات الداخلية بشكل متقطع/سابق والمبيدات الداخلية المستمرة (تراوحت نسبة الوفيات بين 90% و97% باستثناء ذباب الرمل من أناندبور-هاروني الذي بلغت نسبة الوفيات فيه 89.34% بعد 24 ساعة من التعرض) كان على الأرجح مقاومًا للسايبرمثرين عالي الفعالية [25]. أحد الأسباب المحتملة لتطور هذه المقاومة هو الضغط الذي تمارسه برامج الرش الروتيني الداخلي (IRS) وبرامج الرش المحلية القائمة على الحالات، وهي إجراءات قياسية لإدارة تفشي الكالازار في المناطق/الكتل/القرى الموبوءة (إجراء التشغيل القياسي للتحقيق في تفشي المرض وإدارته [30]. توفر نتائج هذه الدراسة مؤشرات مبكرة على تطور الضغط الانتقائي ضد السايبرمثرين عالي الفعالية. لسوء الحظ، فإن بيانات الحساسية التاريخية لهذه المنطقة، والتي تم الحصول عليها باستخدام اختبار زجاجة مركز السيطرة على الأمراض، غير متاحة للمقارنة؛ فقد رصدت جميع الدراسات السابقة حساسية P. argentipes باستخدام ورق مشبع بمبيدات الحشرات من منظمة الصحة العالمية. الجرعات التشخيصية للمبيدات الحشرية في شرائط اختبار منظمة الصحة العالمية هي تركيزات التعريف الموصى بها للمبيدات الحشرية لاستخدامها ضد نواقل الملاريا (Anopheles gambiae)، وقابلية التطبيق العملي لهذه التركيزات على ذباب الرمل غير واضحة لأن ذباب الرمل يطير بشكل أقل تكرارًا من البعوض، ويقضي وقتًا أطول في ملامسة الركيزة في الاختبار الحيوي [23].
وقد تم استخدام البيرثرويدات الاصطناعية في المناطق الموبوءة بداء الفيلاريات الحشوي في نيبال منذ عام 1992، بالتناوب مع ألفا-سايبرمثرين ولامدا-سايهالوثرين للسيطرة على ذبابة الرمل [31]، كما تم استخدام دلتامثرين في بنغلاديش منذ عام 2012 [32]. وقد تم الكشف عن مقاومة النمط الظاهري في التجمعات البرية من ذبابة الرمل ذات الأرجل الفضية في المناطق التي تم فيها استخدام البيرثرويدات الاصطناعية لفترة طويلة [18، 33، 34]. وقد تم الكشف عن طفرة غير مترادفة (L1014F) في التجمعات البرية من ذبابة الرمل الهندية وقد ارتبطت بمقاومة مادة دي دي تي، مما يشير إلى أن مقاومة البيرثرويد تنشأ على المستوى الجزيئي، حيث يستهدف كل من دي دي تي والبيرثرويد (ألفا-سايبرمثرين) نفس الجين في الجهاز العصبي للحشرات [17، 34]. لذلك، فإن التقييم المنهجي لحساسية السايبرمثرين ومراقبة مقاومة البعوض أمران ضروريان أثناء فترة الاستئصال وبعد الاستئصال.
من القيود المحتملة لهذه الدراسة أننا استخدمنا اختبار مركز السيطرة على الأمراض والوقاية منها (CDC) في قارورة لقياس قابلية الإصابة، إلا أن جميع المقارنات المستخدمة كانت نتائج دراسات سابقة استخدمت مجموعة الاختبارات الحيوية لمنظمة الصحة العالمية. قد لا تكون نتائج الاختبارين الحيويين قابلة للمقارنة بشكل مباشر، لأن اختبار مركز السيطرة على الأمراض والوقاية منها في قارورة يقيس انخفاض تركيز المادة في نهاية فترة التشخيص، بينما يقيس اختبار مجموعة منظمة الصحة العالمية معدل الوفيات بعد 24 أو 72 ساعة من التعرض (وهذا الأخير للمركبات بطيئة المفعول) [35]. ومن القيود المحتملة الأخرى عدد القرى التي تطبق نظام الرش الداخلي (IRS) في هذه الدراسة مقارنةً بقرية واحدة غير مُطبقة عليه، وقرية أخرى غير مُطبقة عليه/سابقة عليه. لا يمكننا افتراض أن مستوى قابلية الإصابة بناقلات البعوض المُلاحظ في كل قرية على حدة في منطقة ما يُمثل مستوى قابلية الإصابة في قرى ومناطق أخرى في بيهار. مع دخول الهند مرحلة ما بعد القضاء على فيروس اللوكيميا، من الضروري منع تطور المقاومة بشكل كبير. ويلزم رصد سريع للمقاومة في تجمعات ذبابة الرمل من مناطق وتجمعات سكنية ومناطق جغرافية مختلفة. البيانات المقدمة في هذه الدراسة أولية ويجب التحقق منها بالمقارنة مع تركيزات التعريف التي نشرتها منظمة الصحة العالمية [35] للحصول على فكرة أكثر تحديدًا عن حالة حساسية P. argentipes في هذه المناطق قبل تعديل برامج مكافحة النواقل للحفاظ على انخفاض أعداد ذبابة الرمل ودعم القضاء على فيروس اللوكيميا.
قد تبدأ بعوضة P. argentipes، الناقلة لفيروس داء اللوكيميا، بإظهار علامات مبكرة على مقاومتها لمادة سايبرمثرين عالية الفعالية. يُعدّ الرصد المنتظم لمقاومة المبيدات الحشرية في التجمعات البرية من بعوضة P. argentipes ضروريًا للحفاظ على التأثير الوبائي لتدخلات مكافحة النواقل. يُعدّ تناوب استخدام المبيدات الحشرية بأساليب عمل مختلفة، و/أو تقييم وتسجيل المبيدات الحشرية الجديدة، أمرًا ضروريًا وموصى به لإدارة مقاومة المبيدات الحشرية ودعم القضاء على فيروس داء اللوكيميا في الهند.

 

وقت النشر: ١٧ فبراير ٢٠٢٥