داء الليشمانيات الحشوي، المعروف باسم كالا آزار في شبه القارة الهندية، هو مرض طفيلي تسببه طفيليات الليشمانيا السوطية، وقد يكون مميتًا إذا لم يُعالج فورًا. ذبابة الرمل فليبوتوموس أرجنتيبس هي الناقل الوحيد المؤكد لداء الليشمانيات الحشوي في جنوب شرق آسيا، حيث يُكافح المرض بالرش المتبقي داخل المنازل، وهو مبيد حشري اصطناعي. أدى استخدام مادة DDT في برامج مكافحة داء الليشمانيات الحشوي إلى ظهور مقاومة لدى ذباب الرمل، لذا استُبدلت مادة DDT بمبيد ألفا-سيبرمثرين. مع ذلك، يعمل ألفا-سيبرمثرين بطريقة مشابهة لمادة DDT، مما يزيد من خطر ظهور المقاومة لدى ذباب الرمل تحت الضغط الناتج عن التعرض المتكرر لهذا المبيد. في هذه الدراسة، قمنا بتقييم حساسية البعوض البري ونسله من الجيل الأول باستخدام اختبار الزجاجة الحيوي التابع لمركز السيطرة على الأمراض والوقاية منها.
جمعنا البعوض من 10 قرى في مقاطعة مظفر بور بولاية بيهار في الهند. استمرت ثماني قرى في استخدام مبيد حشري عالي الفعالية.سيبرمثرينفيما يخص الرش الداخلي، توقفت إحدى القرى عن استخدام مبيد السيبرمثرين عالي الفعالية، بينما لم تستخدمه قرية أخرى مطلقًا. عُرِّضت البعوضات التي جُمعت لجرعة تشخيصية محددة مسبقًا لمدة زمنية محددة (3 ميكروغرام/مل لمدة 40 دقيقة)، وسُجِّل معدل التخدير والنفوق بعد 24 ساعة من التعرض.
تراوحت معدلات نفوق البعوض البري بين 91.19% و99.47%، بينما تراوحت معدلات نفوق جيله الأول (F1) بين 91.70% و98.89%. وبعد مرور 24 ساعة على التعرض، تراوحت معدلات نفوق البعوض البري بين 89.34% و98.93%، بينما تراوحت معدلات نفوق جيله الأول (F1) بين 90.16% و98.33%.
تشير نتائج هذه الدراسة إلى أن المقاومة قد تتطور في P. argentipes، مما يدل على الحاجة إلى المراقبة المستمرة واليقظة للحفاظ على السيطرة بمجرد تحقيق الاستئصال.
داء الليشمانيات الحشوي، المعروف باسم كالا آزار في شبه القارة الهندية، هو مرض طفيلي تسببه طفيليات الليشمانيا السوطية، وينتقل عن طريق لدغة أنثى ذبابة الرمل المصابة (ذوات الجناحين: ميرميكوفاجا). ذبابة الرمل هي الناقل الوحيد المؤكد لداء الليشمانيات الحشوي في جنوب شرق آسيا. تقترب الهند من تحقيق هدف القضاء على هذا المرض. ومع ذلك، للحفاظ على انخفاض معدلات الإصابة بعد القضاء عليه، من الضروري تقليل أعداد النواقل لمنع انتقال العدوى.
تُكافح البعوض في جنوب شرق آسيا عن طريق الرش الموضعي داخل المنازل باستخدام المبيدات الحشرية الاصطناعية. ونظرًا لسلوك الراحة الخفي لحشرة ذبابة الأرجل الفضية، فإنها تُعد هدفًا مناسبًا لمكافحة المبيدات الحشرية من خلال الرش الموضعي داخل المنازل [1]. وقد كان للرش الموضعي داخل المنازل بمادة ثنائي كلورو ثنائي فينيل ثلاثي كلورو الإيثان (DDT) ضمن البرنامج الوطني لمكافحة الملاريا في الهند آثار جانبية كبيرة في السيطرة على أعداد البعوض والحد بشكل ملحوظ من حالات داء الليشمانيا الحشوي [2]. وقد دفعت هذه المكافحة غير المخطط لها لداء الليشمانيا الحشوي البرنامج الهندي للقضاء عليه إلى اعتماد الرش الموضعي داخل المنازل كطريقة أساسية لمكافحة ذبابة الأرجل الفضية. وفي عام 2005، وقّعت حكومات الهند وبنغلاديش ونيبال مذكرة تفاهم بهدف القضاء على داء الليشمانيا الحشوي بحلول عام 2015 [3]. كانت جهود الاستئصال، التي تشمل مزيجًا من مكافحة النواقل والتشخيص والعلاج السريع للحالات البشرية، تهدف إلى الدخول في مرحلة التوطيد بحلول عام 2015، وهو هدف تم تعديله لاحقًا إلى عام 2017 ثم إلى عام 2020.[4] تتضمن خارطة الطريق العالمية الجديدة للقضاء على الأمراض المدارية المهملة القضاء على داء الليشمانيا الحشوي بحلول عام 2030.[5]
مع دخول الهند مرحلة ما بعد القضاء على مرض ذبابة الرمل، من الضروري ضمان عدم ظهور مقاومة كبيرة لمادة بيتا-سيبرمثرين. ويعود سبب هذه المقاومة إلى أن كلاً من مادة DDT والسيبرمثرين يعملان بنفس آلية العمل، حيث يستهدفان بروتين VGSC [21]. وبالتالي، قد يزداد خطر ظهور المقاومة لدى ذباب الرمل نتيجة الإجهاد الناجم عن التعرض المنتظم للسيبرمثرين عالي الفعالية. لذلك، من الضروري رصد وتحديد تجمعات ذباب الرمل التي قد تكون مقاومة لهذا المبيد الحشري. في هذا السياق، هدفت هذه الدراسة إلى رصد حالة حساسية ذباب الرمل البري باستخدام جرعات تشخيصية وفترات تعرض محددة من قبل تشوبي وآخرون [20]، الذين درسوا ذباب الرمل من نوع P. argentipes من قرى مختلفة في مقاطعة مظفر بور بولاية بيهار في الهند، والتي تستخدم باستمرار أنظمة رش داخلية معالجة بالسيبرمثرين (قرى IPS المستمرة). تمت مقارنة حالة قابلية الإصابة لدى P. argentipes البرية من القرى التي توقفت عن استخدام أنظمة الرش الداخلي المعالجة بالسايبرمثرين (قرى IPS السابقة) وتلك التي لم تستخدم أنظمة الرش الداخلي المعالجة بالسايبرمثرين مطلقًا (قرى غير IPS) باستخدام اختبار CDC البيولوجي للزجاجات.
تم اختيار عشر قرى للدراسة (الشكل 1؛ الجدول 1)، ثمانٍ منها لها تاريخ من الرش الداخلي المستمر للمبيدات البيرثرويدية الاصطناعية (هايبرميثرين؛ وتُسمى قرى الرش الداخلي المستمر) وسُجلت فيها حالات داء الليشمانيا الحشوي (حالة واحدة على الأقل) خلال السنوات الثلاث الماضية. أما القريتان المتبقيتان في الدراسة، فقد اختيرت إحداهما، وهي قرية لا تُطبق فيها الرش الداخلي لمادة بيتا-سايبرمثرين (قرية غير مُرشّة داخليًا)، لتكون قرية المقارنة، بينما اختيرت الأخرى، وهي قرية تُطبق فيها الرش الداخلي المتقطع لمادة بيتا-سايبرمثرين (قرية مُرشّة داخليًا متقطعة/قرية كانت تُطبق فيها الرش الداخلي سابقًا)، لتكون قرية المقارنة أيضًا. وقد استند اختيار هذه القرى إلى التنسيق مع وزارة الصحة وفريق الرش الداخلي، وإلى التحقق من صحة خطة العمل الجزئي للرش الداخلي في مقاطعة مظفر بور.
خريطة جغرافية لمنطقة مظفر بور تُظهر مواقع القرى المشمولة بالدراسة (1-10). مواقع الدراسة: 1، مانيفولكاها؛ 2، رامداس ماجهولي؛ 3، مادهوباني؛ 4، أناندبور هاروني؛ 5، باندي؛ 6، هيرابور؛ 7، مادوبور هازاري؛ 8، حميدبور؛ 9، نونفارا؛ 10، سيمارا. أُعدّت الخريطة باستخدام برنامج QGIS (الإصدار 3.30.3) وملف Open Assessment Shapefile.
تم تحضير الزجاجات المستخدمة في تجارب التعريض وفقًا لطرق تشاوبي وآخرون [20] ودينلينجر وآخرون [22]. باختصار، تم تحضير زجاجات سعة 500 مل قبل يوم من التجربة، وطُلي جدارها الداخلي بالمبيد الحشري المحدد (الجرعة التشخيصية من ألفا-سيبرمثرين 3 ميكروغرام/مل) عن طريق وضع محلول أسيتون يحتوي على المبيد (2.0 مل) على قاع الزجاجات وجدرانها وغطائها. ثم جُففت كل زجاجة على أسطوانة ميكانيكية لمدة 30 دقيقة. خلال هذه المدة، يُفتح الغطاء ببطء للسماح للأسيتون بالتبخر. بعد 30 دقيقة من التجفيف، يُزال الغطاء وتُدار الزجاجة حتى يتبخر الأسيتون تمامًا. تُترك الزجاجات مفتوحة لتجف طوال الليل. في كل تجربة مكررة، طُليت زجاجة واحدة، استُخدمت كعينة ضابطة، بـ 2.0 مل من الأسيتون. تمت إعادة استخدام جميع الزجاجات طوال التجارب بعد التنظيف المناسب وفقًا للإجراء الموصوف من قبل دينلينجر وآخرون ومنظمة الصحة العالمية [22، 23].
في اليوم التالي لتحضير المبيد الحشري، أُخرجت 30-40 بعوضة برية (إناث جائعة) من الأقفاص في قوارير، ونُفخت برفق في كل قارورة. استُخدم عدد مماثل تقريبًا من الذباب لكل زجاجة مطلية بالمبيد، بما في ذلك المجموعة الضابطة. كُررت هذه العملية خمس إلى ست مرات على الأقل في كل قرية. بعد 40 دقيقة من التعرض للمبيد، سُجل عدد الذباب الذي سقط. جُمع جميع الذباب باستخدام جهاز شفط ميكانيكي، ووُضع في حاويات كرتونية سعة نصف لتر مغطاة بشبكة دقيقة، ووُضعت في حاضنة منفصلة تحت نفس ظروف الرطوبة ودرجة الحرارة مع نفس مصدر الغذاء (كرات قطنية منقوعة في محلول سكري بنسبة 30%) كما في المستعمرات غير المعالجة. سُجلت نسبة النفوق بعد 24 ساعة من التعرض للمبيد. شُرحت جميع البعوضات وفُحصت لتأكيد نوعها. أُجريت نفس العملية مع ذباب الجيل الأول (F1). سُجلت معدلات السقوط والنفوق بعد 24 ساعة من التعرض. إذا كانت نسبة النفوق في زجاجات التحكم أقل من 5%، فلا يتم إجراء أي تصحيح لنسبة النفوق في العينات المكررة. أما إذا كانت نسبة النفوق في زجاجة التحكم تتراوح بين 5% و20%، فيتم تصحيح نسبة النفوق في زجاجات الاختبار لتلك العينة المكررة باستخدام معادلة أبوت. وإذا تجاوزت نسبة النفوق في مجموعة التحكم 20%، يتم استبعاد مجموعة الاختبار بأكملها [24، 25، 26].
متوسط معدل وفيات بعوضة P. argentipes التي تم اصطيادها من البرية. تمثل أشرطة الخطأ الانحراف المعياري للمتوسط. يشير تقاطع الخطين الأفقيين الأحمرين مع الرسم البياني (معدل وفيات 90% و98% على التوالي) إلى نافذة الوفيات التي قد تتطور فيها المقاومة.[25]
متوسط معدل وفيات الجيل الأول من نسل P. argentipes الذي تم اصطياده من البرية. تمثل أشرطة الخطأ الانحراف المعياري للمتوسط. تمثل المنحنيات المتقاطعة مع الخطين الأفقيين الأحمرين (معدل وفيات 90% و98% على التوالي) نطاق معدل الوفيات الذي قد تتطور عنده المقاومة[25].
تبين أن البعوض في قرية مانيفولكاها (التي لم تخضع للرش الموضعي) شديدة الحساسية للمبيدات الحشرية. بلغ متوسط معدل وفيات البعوض البري الذي تم اصطياده بعد 24 ساعة من تخديره وتعريضه للمبيدات 99.47 ± 0.52% و98.93 ± 0.65% على التوالي، بينما بلغ متوسط معدل وفيات الجيل الأول 98.89 ± 1.11% و98.33 ± 1.11% على التوالي (الجدولان 2 و3).
تشير نتائج هذه الدراسة إلى أن ذباب الرمل ذي الأرجل الفضية قد يُطوّر مقاومةً لمبيد البيريثرويد الاصطناعي ألفا-سيبرمثرين في القرى التي استُخدم فيها هذا المبيد بشكل روتيني. في المقابل، وُجد أن ذباب الرمل ذي الأرجل الفضية الذي جُمع من قرى غير مشمولة ببرنامج الرش الموضعي/المكافحة شديد الحساسية. يُعدّ رصد حساسية تجمعات ذباب الرمل البرية أمرًا بالغ الأهمية لمراقبة فعالية المبيدات الحشرية المستخدمة، إذ قد تُساعد هذه المعلومات في إدارة مقاومة المبيدات الحشرية. وقد سُجّلت مستويات عالية من مقاومة مادة DDT بشكل منتظم في ذباب الرمل من المناطق الموبوءة في بيهار نتيجةً للضغط الانتقائي التاريخي الناتج عن استخدام هذا المبيد في برنامج الرش الموضعي [1].
وجدنا أن ذباب الرمل الفضي (P. argentipes) شديد الحساسية للمبيدات البيرثرويدية، وأظهرت التجارب الميدانية في الهند وبنغلاديش ونيبال أن الرش المتبقي داخل المنازل (IRS) يتمتع بفعالية عالية في مكافحة الحشرات عند استخدامه مع السيبرمثرين أو الدلتا مثرين [19، 26، 27، 28، 29]. وفي الآونة الأخيرة، أفاد روي وآخرون [18] أن ذباب الرمل الفضي قد طور مقاومة للمبيدات البيرثرويدية في نيبال. وأظهرت دراستنا الميدانية لحساسية ذباب الرمل الفضي الذي جُمع من قرى لم تتعرض للرش المتبقي داخل المنازل أنه شديد الحساسية، بينما كان الذباب الذي جُمع من قرى تعرضت للرش المتبقي داخل المنازل بشكل متقطع/سابق، وكذلك من قرى تعرضت له بشكل مستمر (تراوحت نسبة النفوق من 90% إلى 97% باستثناء ذباب الرمل من أناندبور-هاروني الذي بلغت نسبة النفوق فيه 89.34% بعد 24 ساعة من التعرض) مقاومًا على الأرجح للسيبرمثرين عالي الفعالية [25]. أحد الأسباب المحتملة لتطور هذه المقاومة هو الضغط الناتج عن الرش الروتيني داخل المنازل وبرامج الرش المحلية القائمة على الحالات، وهي إجراءات معيارية لإدارة تفشي داء الليشمانيا الحشوي في المناطق/الأحياء/القرى الموبوءة (إجراءات التشغيل القياسية للتحقيق في تفشي المرض وإدارته [30]). تُقدم نتائج هذه الدراسة مؤشرات مبكرة على تطور ضغط انتقائي ضد السيبرمثرين عالي الفعالية. لسوء الحظ، لا تتوفر بيانات تاريخية عن حساسية هذه المنطقة، والتي تم الحصول عليها باستخدام اختبار الزجاجة الحيوي التابع لمراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها، للمقارنة؛ فقد رصدت جميع الدراسات السابقة حساسية ذبابة الرمل (P. argentipes) باستخدام ورق مشبع بمبيدات حشرية من منظمة الصحة العالمية. تُعد الجرعات التشخيصية للمبيدات الحشرية في شرائط اختبار منظمة الصحة العالمية هي تركيزات تحديد المبيدات الحشرية الموصى بها للاستخدام ضد نواقل الملاريا (بعوضة الأنوفيلة الغامبية)، ولا يزال التطبيق العملي لهذه التركيزات على ذباب الرمل غير واضح لأن ذباب الرمل يطير بوتيرة أقل من البعوض، ويقضي وقتًا أطول في ملامسة الركيزة في الاختبار الحيوي [23].
استُخدمت البيريثرويدات الاصطناعية في المناطق الموبوءة بداء الليشمانيا الحشوي في نيبال منذ عام 1992، بالتناوب مع البيريثرويدات الاصطناعية ألفا-سيبرمثرين ولامدا-سيهالوثرين لمكافحة ذباب الرمل [31]، كما استُخدم الدلتا مثرين في بنغلاديش منذ عام 2012 [32]. وقد رُصدت مقاومة ظاهرية في تجمعات ذباب الرمل ذي الأرجل الفضية البرية في المناطق التي استُخدمت فيها البيريثرويدات الاصطناعية لفترة طويلة [18، 33، 34]. كما رُصدت طفرة غير مترادفة (L1014F) في تجمعات ذباب الرمل الهندي البرية، وارتبطت بمقاومة مادة DDT، مما يشير إلى أن مقاومة البيريثرويدات تنشأ على المستوى الجزيئي، حيث يستهدف كل من DDT والبيريثرويد (ألفا-سيبرمثرين) نفس الجين في الجهاز العصبي للحشرة [17، 34]. لذلك، فإن التقييم المنهجي لحساسية البعوض لمادة السايبرمثرين ومراقبة مقاومته أمران ضروريان خلال فترتي الاستئصال وما بعد الاستئصال.
من القيود المحتملة لهذه الدراسة استخدامنا لاختبار القارورة الحيوية التابع لمراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها لقياس الحساسية، بينما اعتمدت جميع المقارنات على نتائج دراسات سابقة استخدمت مجموعة اختبار منظمة الصحة العالمية الحيوية. قد لا تكون نتائج الاختبارين قابلة للمقارنة المباشرة، لأن اختبار القارورة الحيوية التابع لمراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها يقيس معدل تثبيط الفيروس في نهاية فترة التشخيص، بينما يقيس اختبار منظمة الصحة العالمية معدل الوفيات بعد 24 أو 72 ساعة من التعرض (الأخير للمركبات بطيئة المفعول) [35]. ومن القيود المحتملة الأخرى عدد القرى التي خضعت للرش المتبقي داخل المنازل في هذه الدراسة مقارنةً بقرية واحدة لم تخضع للرش المتبقي داخل المنازل وقرية أخرى لم تخضع له سابقًا. لا يمكننا افتراض أن مستوى حساسية ناقل البعوض الملاحظ في قرى معينة في مقاطعة واحدة يمثل مستوى الحساسية في قرى ومقاطعات أخرى في بيهار. مع دخول الهند مرحلة ما بعد القضاء على فيروس اللوكيميا، يصبح من الضروري منع تطور مقاومة كبيرة. لذا، يلزم رصد سريع للمقاومة في تجمعات ذباب الرمل من مختلف المقاطعات والمناطق الجغرافية. البيانات المعروضة في هذه الدراسة أولية ويجب التحقق منها من خلال المقارنة مع تركيزات التعريف التي نشرتها منظمة الصحة العالمية [35] للحصول على فكرة أكثر تحديدًا عن حالة قابلية الإصابة بـ P. argentipes في هذه المناطق قبل تعديل برامج مكافحة النواقل للحفاظ على انخفاض أعداد ذباب الرمل ودعم القضاء على فيروس اللوكيميا.
قد تبدأ بعوضة P. argentipes، الناقلة لفيروس اللوكيميا، بإظهار علامات مبكرة للمقاومة لمبيد السايبرمثرين عالي الفعالية. يُعد الرصد المنتظم لمقاومة المبيدات الحشرية في تجمعات P. argentipes البرية ضروريًا للحفاظ على التأثير الوبائي لتدخلات مكافحة النواقل. كما يُوصى بتناوب استخدام المبيدات الحشرية ذات آليات العمل المختلفة، و/أو تقييم وتسجيل المبيدات الحشرية الجديدة، وذلك لإدارة مقاومة المبيدات الحشرية ودعم القضاء على فيروس اللوكيميا في الهند.
تاريخ النشر: 17 فبراير 2025